高效液相色谱法测定植物的内源激素含量
简介
植物内源激素对植物的生长发育起着极其重要的调控作用,极微量就表现出明显的生理作用。但由于植物体内源激素浓度很低,而且植物体成分复杂,干扰组分多,分离时易被破坏,给激素的分析测定工作带来许多困难。
酶联免疫法检测植物内源激素灵敏度高但重复性较低,高效液相色谱法适用于多类不同性质化合物的测定和分离,具有灵敏度高,选择 性、重复性好及分析速度快等特点,是较为理想的植物内源激素分析方法。本实验介绍生长 素(IAA)、赤霉素(GA)、玉米素(ZR)和脱落酸(ABA)四种激素的提取和测定方法。
原理
高效液相色谱法在经典色谱法的基础上,引用了气相色谱的理论,具有高压、高 速、高效、高灵敏度等优点。色谱仪中的分离系统包括固定相和流动相,溶于流动相的各组分经过固定相时,由于与固定相发生作用(吸附、分配、离子吸引、排阻、亲和)的大小、强弱程度不同,在固定相中滞留时间不同,从而先后从固定相中流出,进入检测器进行检测。
来源:丁香实验