荧光素酶 D-荧光素钾盐发光物 PerkinElmer 122799

122799荧光素钾盐 美国PE 荧光素酶 D-荧光素钾盐发光物-小动物活体成像技术核心金标准试剂D-荧光素是一种在生物细胞中发现的化学物质，可产生生物发光。当荧光素在萤火虫荧光素酶和ATP的催化作用下被氧化时，产生光。荧光素能够穿透细胞膜并且可以用于监测已被转导以表达荧光素酶的体内感兴趣细胞的活性。因为与荧光素酶的反应是ATP依赖性的，所以也可以确定细胞活性。荧光素生物发光底物已经在许多的被验证体内使用PerkinElmer的IVIS生物光子成像应用®成像系统。荧光素对于进行生物发光测定至关重要 – 您的研究质量取决于你的荧光素质量。这就是为什么PerkinElmer在体内临床前成像领域为世界领先者。XenoLight D-Luciferin K + Salt优化用于体内成像。美国PE 122799 D-荧光素钾盐发光物 荧光素酶 生物发光荧光素底物，仅供研究使用，不用于诊断过程。 荧光素可以多种方式使用。它可以用于各种体外试验，其中 可以用发光计或闪烁计数器监测光的产生。 它还可用于监测体内光产生，并可使用PerkinElmer的IVIS®进行监测成像平台。因为荧光素可以穿透细胞膜，它可以使转化的细胞成为细胞膜监测荧光素酶活性。 Luciferin也可与PerkinElmer的Bioware®Brite荧光素酶一起使用表达肿瘤细胞系和我们的Red-FLuc慢病毒颗粒。

用于体外生物发光测定的荧光素的制备

一、实验材料准备和执行步骤

实验材料准备

•D-Luciferin萤光素钾盐，1.0克/瓶（PerkinElmer订货＃122799）

•无菌水

•完整的媒介

应将细胞接种于平板中过夜或测定前数小时，以使细胞附着于细胞 底部。可以将悬浮细胞系接种在平板中的工作溶液中以进行直接培养成像。

如果倍增时间相对较短，则应考虑倍增时间进行细胞计数。

执行步骤

1.在无菌水中制备200X荧光素储备液（30 mg / ml）。注意：人们可以重建 将全部1.0克D-荧光素在33.3毫升无菌水中制成30毫克/毫升（200倍）的原液，或重建个体实验所需的D-荧光素的量。

2.通过倒置轻轻混合，直至荧光素完全溶解

3.在预热的组织培养基中制备150μg/ ml的D-荧光素工作溶液。 快速解冻200X荧光素的储备溶液，并在完全培养基中稀释1：200（最终150μg/ ml）浓度）。

4.从培养的细胞中吸出培养基。

5.在成像前将1x荧光素溶液加入细胞中。注意：将细胞在37°C下短时间孵育在成像之前可以增加信号。孵育时间取决于特定的细胞类型。一般来说孵育10分钟就足够了;根据需要进行测试和调整。

6.每隔10分钟，最多40分钟，使用IVIS成像系统检查体外生物发光确定动力学曲线并找出每种细胞类型的峰值成像时间点。