3D培养至少有五种方法，一种水凝胶就能实现
The Well BioscienceVitroGel水凝胶体
3D培养至少有五种方法，一种水凝胶就能实现
The Well Bioscience是—家位于美国新泽西州的高科技创新生物技术公司。成立于2017年，专注于开发更易用的、无动物成分、可自定义的三维细胞培养的解决方案。产品为各种修饰分子修饰的VitroGel和VitroINK，最新推出了专门培养类器官、ES/iPS、MSC等培养基质。
3D培养如火如荼的今天，寻求更易用、普适的培养基质成为了关乎细胞培养效率及结果的关键一环。
现在为大家介绍的无异源的VitroGel水凝胶体系有多种用途。可以选择即用型VitroGel实现简单的操作，也可以通过“Mix&Match”浓缩型VitroGel来构建个性化的微环境。
这里我们整理了水凝胶*热门的五种使用方式，包括：
- 3D细胞培养
- 2D水凝胶包被
- 静态悬浮培养
- 水凝胶-细胞珠
- 动物注射
这5种培养方法适用于即用型和浓缩型VitroGel。用VitroGel®细胞回收液可以很容易地收获在用方法培养的细胞，从而进行下游分析或传代培养。
一、3D细胞培养
VitroGel是3D细胞培养的理想选择。通过在室温下简单地将VitroGel溶液与细胞悬液混合，转移到培养板中并加入培养基即可。这种3D培养方法使细胞被*包裹，从而增强了细胞-水凝胶基质的相互作用。许多下游分析，如药物筛选、免疫荧光分析和细胞毒性测定都可以直接在水凝胶中进行。
二、2D水凝胶包被
2D水凝胶包被方法是介于传统2D培养与3D细胞包埋培养之间的方法。通过在室温下将VitroGel溶液与细胞培养基混合并转移到培养板上，VitroGel可以在培养板底部被包被成较厚的水凝胶。细胞可以直接接种至水凝胶上表面。2D水凝胶包被这种方法使得细胞与功能性水凝胶间相互作用/浸没，并能很好的保持其与上层培养基的充分接触。当细胞在水凝胶表面迁移/聚集时，可快速形成细胞团。2D水凝胶包被可与3D细胞培养方法结合，从而替代传统的共培养：将一种细胞包裹在水凝胶中进行3D培养，然后在水凝胶顶部接种另一种类型的细胞。
另外，2D包被VitroGel也可以成为研究细胞侵袭、血管生成实验和逐层共培养的强大系统。除2D厚凝胶涂层外，将VitroGel稀释后用于薄凝胶包被的方法效果也很不错。
三、3D静态悬浮培养
3D静态悬浮培养是VitroGel水凝胶一种*的培养方法。通过混合VitroGel溶液和细胞形成较软的水凝胶，研究人员可以进一步将水凝胶-细胞混合物与培养基直接混合，制成水凝胶-细胞悬液。水凝胶分散在细胞培养基内可以增加整个混合物的粘度，帮助细胞在不强烈搅拌的情况下保持悬浮状态。
3D静态悬浮培养易于制备，可以通过简单地改变水凝胶和细胞培养基的混合比，灵活地调整各种细胞类型的接种密度和最终粘度。例如，研究者可以按固定的2:1（水凝胶溶液：细胞，v/v）制备水凝胶-细胞混合物，然后再与细胞培养基以1:1至1:10的比例混合，得到不同粘度的最终水凝胶-细胞混悬液。
这种培养方法可以用于实验室或工业规模的细胞放大培养，不再需要昂贵的生物反应器或昂贵的培养容器。我们已将其用于干细胞团和HEK293球体的培养。该方法也适用于我们所有即用型VitroGel和浓缩型VitroGel系统。培养后，可以 通过离心很容易地回收经VitroGel静态悬浮培养的细胞。
四、水凝胶-细胞珠法
作为一种可注射的水凝胶系统，VitroGel具有*的剪切和流变特性。水凝胶溶液可以与细胞混合形成较软的水凝胶，然后可以作为液滴加入细胞培养基中形成水凝胶-细胞珠。
这种培养方法不仅能将细胞包裹在水凝胶内，以增强细胞-基质相互作用，还可使整个水凝胶-细胞珠悬浮在细胞培养基中，以获得最佳的培养基接触面积。研究人员可以通过改变添加到培养基中的液滴体积来调整水凝胶珠的大小。
对于需要贴壁才能生长的细胞，如间充质干细胞(MSCs)，这种水凝胶-细胞珠培养方法是替代微载体进行3D细胞放大培养的一种巧妙方式。由于具有优良的培养基和氧气穿透力，在水凝胶珠中培养的细胞可以保持较高的细胞活力，从而进行长期培养。该方法适用于所有即用型VitroGel和高浓度VitroGel系统。使用VitroGel水凝胶-细胞珠培养的细胞可通过VitroGel细胞回收液进行回收。
五、动物注射
VitroGel同样也是一种优秀的动物注射载体。在机械剪切力作用下，通过注射器注射，水凝胶可以进行凝胶-溶胶的转变，成为自由流动状态。然而，一旦剪切力停止，水凝胶的机械强度可以随着溶胶-凝胶转变而迅速恢复，再次成为水凝胶状态。VitroGel具有这种可注射的特性，可用于体内细胞/药物递送，用于细胞治疗或控释。
室温下将水凝胶溶液与细胞/化合物混合，水凝胶可在20 min内注射。除了即用型VitroGel，还可以使用浓缩型VitroGel水凝胶得到不同强度的可注射水凝胶。
The Well Bioscience品牌即用型水凝胶产品货号：
| 产品品牌 | 产品编号 | 产品名称 | 产品详情 |
| The Well Bioscience | VHM01 | VitroGel Hydrogel Matrix (2 mL/10 mL) | 基础款即用型3D培养水凝胶基(适合大多数细胞的3D培养) |
| The Well Bioscience | VHM02 | VitroGel STEM (10 mL) | ES/iPS细胞培养专用 |
| The Well Bioscience | VHM03 | VitroGel MSC (10 mL) | MSC培养专用 |
| The Well Bioscience | VHM04-K | VitroGel ORGANOID Discovery Kit (4X 2mL) | 类器官培养开发试剂盒 |
| The Well Bioscience | VHM04 | VitroGel ORGANOID- 1/2/3/4 (10 mL) | 类器官培养专用 |
| The Well Bioscience | VHM05 | VitroGel HEK293 (10 mL) | HEK293细胞培养专用 |
| The Well Bioscience | VHM06S | VitroGelo Angiogenesis Assay Kit Hydrogel (2mL)| | 血管生 成研究试剂盒 |
The Well Bioscience品牌浓缩型水凝胶产品货号：
| 产品品牌 | 产品编号 | 产品名称 | 产品详情 |
| The Well Bioscience | TWG001| | VitroGel 3D High Concentration Kit (3 mL) | 适用于细胞成球、悬浮细胞或需要低细胞基质相互作用的细胞 |
| The Well Bioscience | TWG003 | VitroGel RGD High Concentration Kit (3 mL) | 适用于黏附细胞或需要更强细胞基质相互作用的细胞 |
| The Well Bioscience | TWG007 | VvitroGel IKVAV High Concentration Kit(3mL) | IKVAV是位于层粘连蛋白a- 1链长臂c端的生物活性序列，积极参与不同的生物活性，如神经元祖细胞分化、促进细胞粘附、神经突生长和肿瘤生长 |
| The Well Bioscience | TWG008 | VitroGel YIGSR High Concentration Kit (3 mL) | YIGSR序列位于层粘连蛋白β1链上，涉及内皮细胞粘附、细胞增殖和运动/迁移 |
| The Well Bioscience | TWG009 | VitroGel COL High Concentration Kit (3 mL) | COL水凝胶在体外能促进成骨细胞分化，在体内能增强成骨细胞活性,在组织工程和再生医学方面具有很大的应用潜力 |
| The Well Bioscience | TWG010| | VitroGel MMP High Concentration Kit (3 mL) | MMP酶敏水凝胶可被多种基质金属蛋百酶(MMP1、2、3、9和13) 降解，并支持不同的生物活性，如细胞增殖、迁移(粘附/分散)、分化、凋亡等 |
| The Well Bioscience | TWG011 | VitroGel Angiogenesis Assay HC Kit Hydrogel| | 血管生成实验,血管形成,侵袭,动物注射等应用 |
The Well Bioscience品牌辅助试剂产品货号：
| 产品品牌 | 产品编号 | 产品名称 | 产品详情 |
| The Well Bioscienc | MS01-100 | VitroGelo Dilution Solution (100 mL) TYPE1 | 用于稀释浓缩型水凝胶,含蔗糖以保持最佳渗透性 |
| The Well Bioscienc | MS02-100 | VitroGele Dilution Solution (100 mL) TYPE2 | 用于稀释浓缩型水凝胶，不含蔗糖，针对培养基中糖含量敏感的细胞 |
| The Well Bioscienc | MS03-100 | VitroGel Cell Recovery Solution (100 mL) | 用于 从VitroGel水凝胶中回收细胞,同时保持细胞活力 |
| The Well Bioscienc | BM01 | | Cyto3DTM Live-Dead Assay Kit | 用于3D, 2D包被或单层培养的细胞活力分析 |
The Well Bioscience品牌3D打印墨水产品货号：
| 产品品牌 | 产品编号 | 产品名称 | 产品详情 |
| The Well Bioscienc | INK01 | VitroINK 3D (3 mL/10 mL) | 无动物成分、可调节硬度的生物墨水 |
| The Well Bioscienc | INK02 | VitroINK RGD (3 mL/10 mL) | RGD肽修饰的无动物成分、可调节硬度的生物墨水 |
| The Well Bioscienc | ISK01 | | VitrolNK 3D-Bioink Starter Kit (3 mL/10 mL) | 生物墨水和完整的混合工具包，用于制备3D生物打印的细胞/生物墨水混合物 |
| The Well Bioscienc | ISK02 | VitrolNK RGD-Bioink Starter Kit (3 mL/10 mL) | 生物墨水和完整的混合工具包， 用于制备3D生物打印的细胞/生物墨水混合物 |
| The Well Bioscienc | IMK01 | VitrolINK Mixing Kit- 1 mL Syringe (1 pack/10 pack) | 生物墨水与细胞混合试剂盒 |
| The Well Bioscienc | IMK03 | VitroINK Mixing Kit -3 mL Syringe (1 pack/10 pack) | 生物墨 水与细胞混合试剂盒 |
